经过短暂而认真的准备之后 ， 班超就和郭恂率领三十六名部下向西域进发 。班超先到鄯善(今新疆罗布泊西南) 。鄯善王对班超等人先是嘘寒问暖 ， 礼敬备致 ， 后突然改变态度 ， 变得疏懈冷淡了 。班超凭着自己的敏感 ， 估计必有原因 。他对部下说：“宁觉广礼意薄乎？此必有北虏使来 ， 狐疑未知所从故也 。明者睹未萌 ， 况已着邪”(《后汉书·班超列传》) 。
于是 ， 班超便把接待他们的鄯善侍者找来 ， 出其不意地问他：“匈奴使来数日 ， 今安在乎”(《后汉书·班超列传》)？侍者出乎意料 ， 仓猝间难以置词 ， 只好把情况照实说了 。班超把侍者关押起来 ， 以防泄露消息 。接着 ， 立即召集部下三十六人 ， 饮酒高会 。饮到酣处 ， 班超故意设辞激怒大家：“卿曹与我俱在绝域 ， 欲立大功 ， 以求富贵 。今虏使到裁数日 ， 而王广礼敬即废；如令鄯善收吾属送匈奴 ， 骸骨长为豺狼食矣 。为之柰何？”众人都说：“今在危亡之地 ， 死生从司马 。”班超说：“不入虎穴 ， 不得虎子 。当今之计 ， 独有因夜以火攻虏 ， 使彼不知我多少 ， 必大震怖 ， 可殄尽也 。灭此虏 ， 则鄯善破胆 ， 功成事立矣 。”有部下说：“当与从事议之”班超大怒 ， 说：“吉凶决于今日 。从事文俗吏 ， 闻此必恐而谋泄 ， 死无所名 ， 非壮士也”(《后汉书·班超列传》)！部下一致称是 。
这天天刚黑 ， 班超率领将士直奔匈奴使者驻地 。时天刮大风 ， 班超命令十个人拿着鼓藏在敌人驻地之后 ， 约好一见火起 ， 就猛敲战鼓 ， 大声呐喊 。并命令其他人拿着刀枪弓弩埋伏在门两边 。安排已毕 ， 班超顺风纵火 ， 一时 ， 三十六人前后鼓噪 ， 声势喧天 。匈奴人乱作一团 ， 逃遁无门 。班超亲手搏杀了三个匈奴人 ， 他的部下也杀死了三十多人 ， 其余的匈奴人都葬身火海 。
第二天 ， 班超将此事报知郭恂 。郭恂先是吃惊 ， 接着脸上出现了不平之色 。班超知道他心存嫉妒 ， 便抬起手来对他说：“掾虽不行 ， 班超何心独擅之乎”(《后汉书·班超列传》)？郭恂喜动颜色 。班超于是请来了鄯善王 ， 把匈奴使者的首级给他看 ， 鄯善王大惊失色 ， 举国震恐 。班超好言抚慰 ， 晓之以理 ， 鄯善王表示愿意归附汉朝 ， 并且同意把王子送到汉朝作质子 。
班超完成使命 ， 率众回都 ， 把情况向窦固作了汇报 。窦固大喜 ， 上表奏明班超出使经过和所取得的成就 ， 并请皇帝选派使者再度出使西域 。皇帝很欣赏班超的勇敢和韬略 ， 认为他是难得的人才 ， 对窦固说：“吏如班超 ， 何故不遣而更选乎？今以超为军司马 ， 令遂前功”(《后汉书·班超列传》) 。窦固认为班超手下的人太少 ， 想给他再增加一些 。班超却说：“愿将本所从三十余人足矣 。如有不虞 ， 多益为累”(《后汉书·班超列传》) 。
班超等人向西域进发 ， 不久 ， 到了于阗(亦作于真 ， 王治西城 ， 今新疆和田) 。当时 ， 于阗王广德新近攻破莎车(王治莎车城 ， 今新疆莎车) ， 在南道雄帜高张 ， 匈奴人派使者驻在于阗 ， 名为监护其国 ， 实际上掌握着该国的大权 。班超到于阗后 ， 于阗王对他不修礼貌 ， 颇为冷淡 。于阗巫风炽盛 ， 巫者对于阗王说：“神怒何故欲向汉？汉使有騧马 ， 急求取以祠我”(《后汉书·班超列传》) 。于阗王派人向班超讨要那匹马 ， 班超早已清楚事情原委 ， 痛快地答应了 。但是提出要神巫自己来牵 。等到神巫到来 ， 班超不由分说 ， 将他杀死 ， 把首级送还于阗王 ， 晓以利害 ， 责以道义 。于阗王早就听说过班超在鄯善国诛杀匈奴使者的作为 ， 颇为惶恐 ， 当即下令杀死匈奴使者 ， 归附汉王朝 。班超重赏了于阗国王及其臣子们 。
当时 ， 匈奴人扶立的龟兹(王治延城 ， 今新疆库车县城东郊)国王倚仗匈奴的势力在北道肆行无忌 。他派兵攻破疏勒(王治疏勒 ， 今新疆喀什市)国 ， 杀死国王 ， 另立龟兹人兜题为疏勒王 ， 疏勒国实际掌握在龟兹人手中 。第二年春 ， 班超带手下人从小道向疏勒国进发 。班超行至兜题居住的架橐城九十里的地方 ， 派手下吏员田虑去招降兜题 。班超指示说：“兜题本非疏勒种 ， 国人必不用命 。若不即降 ， 便可执之”(《后汉书·班超列传》) 。田虑只身来见兜题 。兜题见田虑势单力孤 ， 根本没有投降的意思 。田虑乘其不备 ， 抢上去劫持了他 。变起突然 ， 兜提手下的人惊惧奔走 。田虑乘马疾驰 ， 到班超处复命 。班超当即来到架橐城 。他把疏勒文武官员全部集中起来 ， 向他们陈说龟兹种种不合理的行径 ， 宣布另立原来被杀掉的疏勒国君的侄儿叫“忠”的当国王 。疏勒人大悦 。新王和一班官员要杀死兜题 ， 但班超从大局出发 ， 为了宣示汉王朝的威德信义 ， 说服大家 ， 释放了兜题 。疏勒平定 。

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