hiv病毒在人体内逆转录过程( 二 )


当前病毒活化而自身转录时,LTR起着启动和增强其转录的作用 。在宿主RNA聚合酶的作用下,病毒DNA转录为RNA并分别经过拼接 , 加冒或者加尾形成HIV的mRNA或子代病毒RNA 。mRNA在宿主细胞核糖体上翻译蛋白质,经过进一步酶解和修饰等形成病毒结构蛋白或调节蛋白;子代RNA则与病毒源结构蛋白装配成核衣壳,从宿主细胞释放出时获得包膜,形成具有感染性的子代病毒 。
HIV仅感染具有表面分子CD4的T细胞和巨噬细胞 。
不是 , 只有逆转录病毒侵染细胞时才有逆转录过程 。
逆转录(reverse
transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成 。是 RNA病毒的复制形式,需 逆转录酶的催化 。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的 逆转录病毒 。
更正一下tchxb的答案:
先转出与RNA互补的DNA单链,后转出双链DNA
RNA首先反转录成cDNA(负链DNA),构成RNA-DNA中间体中间体中的RNA再经过RNA酶H水解,而以剩下的负链DNA复制成双股DNA
tchxb的答案基本上是对的
逆转录过程需要的酶是
ADNA指导的DNA聚合酶
B核酸酶
CRNA指导的RNA聚合酶
DDNA指导的RNA聚合酶
E逆转录酶
正确答案:
内容目录:
RT-qPCR简介
RT-qPCR逆转录过程
RT-qPCR 的 qPCR 过程
定量逆转录PCR(quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR)是应用于以RNA作为起始材料的PCR实验中的一种实验方法 。在该方法中,总RNA或信使RNA(mRNA)首先通过逆转录酶转录成互补DNA(cDNA) 。随后,以cDNA为模板进行qPCR反应 。RT-qPCR已被用于多种分子生物学的应用中,其中包括基因表达分析、RNA干扰验证、微阵列验证、病原体检测、基因测试和疾病研究 。
RT-qPCR可通过一步法或两步法来完成(图1、表1) 。一步法RT-qPCR把逆转录与PCR扩增结合在一起,使逆转录酶与DNA聚合酶在同一管内同样缓冲液条件下完成反应 。一步法RT-qPCR只需要利用序列特异性引物 。在两步法RT-qPCR中,逆转录和PCR扩增过程是在两个管中完成 , 使用不同的优化的缓冲液、反应条件、以及引物设计策略 。
在设计RT-qPCR实验过程中 , 决定是否要使用总RNA或纯化的mRNA作为模板进行逆转录十分重要 。尽管mRNA可能能够提供略高的灵敏度,但总RNA仍经常使用 。其原因是总RNA作为起始材料具有较mRNA更重要的优势 。首先,其过程需要较少的纯化步骤,这确保了更好的定量回收模板和更好的把结果标准化为起始的细胞数 。其次,其避免了mRNA富集步骤,这能够避免由于不同mRNA的回收率不同而带来的结果偏移的可能性 。总的来说,由于在大多数的应用中,目标基因的相对定量比检测的绝对灵敏度更为重要 , 因此在大多数情况下,总RNA更适用1 。