校准曲线|做标准曲线的12个经典问题( 三 )




10、标准曲线的线性范围?


线性范围这个大家都比较清楚 , 主要从相关系数r看 , 一般要求r大于等于三个九 。之前做实验有时候浓度高时 , 线性不好 , 高浓度点不在标准曲线上 , 而是在标准曲线的下面 , 而且离拟合的标准曲线比较远 。遇到这种情况 , 标准曲线的线性相关系数就很差 , 有时候才一个九 , 最后我终于想明白了 , 如果自己用手动拟合的话 , 用平滑的曲线去连接所有点的话 , 你就会发现 , 如果在线性范围内 , 连接起来就是直线 , 如果超出了线性范围 , 连接起来就是一条弯曲的曲线 。


11、相关系数的有效数字?


GB5750.3-2006 8.2.7项有如下规定:校准曲线相关系数只舍不入 , 保留到小数点后出现非9的一位 , 如0.99989→0.9998 。如果小数点后都是9时 , 最多保留小数点后4位 。


12、Y=bX和二次曲线的选用?


标准曲线我们通常采用的是Y=a+bX , 曲线拟合完必须要做统计检验 , 且要做统计完备的线性检验和失拟检验 , 然后再做a与0的差别检验 , 如果a与0的统计学上无差异 , 你就可以考虑用Y=bX的拟合曲线 , 拟合出来后同样做线性检验和失拟检验 , 如果线性检验合格(P<0.05)且失拟检验合格(P>0.05)此时你就可以采用Y=bX 。


二次曲线的采用同样是这样的道理 , 如果你Y=a+bX时拟合不合格 , 你就考虑用Y=a+bX+cX2 , 同样做失拟检验 , 考察拟合的符合情况 。如果Y=a+bX和Y=a+bX+cX2都满足拟合检验和失拟检验合格 , 则采用Y=a+bX形式 , 这样符合统计学上参数最少的统计简洁性原则 。


标准曲线法有一定的优势 , 也有一定的缺陷 , 它特别适合于大量样品的分析 。但由于每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能 , 柱温 , 流动相流速及组成 , 进样量 , 柱效等)很难完全相同 , 因此容易出现较大误差 。此外 , 标准工作曲线绘制时 , 一般使用欲测组分的标准样品(或已知准确含量的样品) , 而实际样品的组成却千差万别 , 因此必将给测量带来一定的误差 。


了解各个分析项目校准曲线斜率的稳定性及影响稳定性的主要因素 , 可决定是否能采用带标点检验原校准曲线 , 省略重新制作校准曲线;从校准曲线斜率的变化 , 可判断标准溶液的稳定性 , 从而确定其标定周期;分析低浓度百思特网样品时 , 应使用高纯度的水和试剂 , 以减少空白值 , 降低样品的分析误差 。


科学地运用校准曲线 , 对于降低分析成本、提高检测质量有着重要的意义 。
校准曲线|做标准曲线的12个经典问题