高中生物里面，什么用到了差速离心法什么用到了梯度离心法( 四 ) _梯度

密度梯度离心（densitygradientcentrifugation）
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。
A等速度沉降，B等密度沉降
二、密度梯度离心
速度沉降（velocitysedimentation）主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。这种沉降方法所采用的介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。生物颗粒（细胞或细胞器）在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。
等密度沉降（isopycnicsedimentation）适用于分离密度不等的颗粒。细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和足够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的细胞或细胞器分离。介质的最高密度应大于被分离组分的最大密度，而且介质的梯度要求较高的陡度，不能太平缓。这种方法适于分离细胞器，而不太适于分离和纯化细胞。
叶绿体的分离
实验方法
1选取新鲜的嫩菠菜叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉，撕成小碎块，称3g放于玻璃匀浆器中，加入10ml035MNaCl溶液，匀浆3～5min 。
2匀浆液用4层纱布过滤于50ml烧杯中。
3将滤液平分到2个离心管中，天平配平，1000r/min下离心2min 。弃去沉淀。
4将上清液在3000r/min下离心5min 。弃去上清，沉淀即为叶绿体。
5将沉淀用035MNaCl溶液悬浮，取一滴叶绿体悬液滴于载片上，加盖片观察：
①在普通光镜下观察；②在荧光显微镜下观察。
实验结果
1普通光镜下，可看到叶绿体为绿色橄榄型，在高倍镜下可看到叶绿体内部含有较深的绿色颗粒，即基粒。
2荧光显微镜下，选用蓝色激发滤光片，叶绿体发出火红色荧光
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